La pyridine se comporte comme une base à travers la paire isolée de l'atome d'azote. En présence d'acides, il est protoné, générant des sels de pyridinium.

La basicité de l'azote est modifiée par la présence de substituants. Ainsi, les groupements qui cèdent de la charge par effet de résonance (mésomère) ont tendance à augmenter la basicité de l'azote, tandis que ceux qui dérobent de la charge par effet de résonance diminuent la basicité.

Comme on peut l'observer dans le pKas, l'aminé augmente la basicité de l'azote en transférant la paire libre vers l'hétéroatome. Cependant, le groupe cyano vole de la charge, à la fois par effet inductif et par résonance de l'azote annulaire, diminuant considérablement sa basicité.

La position du substituant dans le cycle détermine également le degré de basicité de l'azote, avec de grandes différences entre la basicité des trois amino pyridines.